Normal oksijen ve hipoksik koşullarda VEGF sitokininin ADAMTS-2 ve ADAMTS-3 genlerinin ifadeleri üzerinde etkisi / Candan Akdır ; tez danışmanı Prof. Dr. Feray Köçkar.

Tez (Yük)--Balıkesir Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Moleküler Biyoloji ve Genetik Anabilim Dalı.

Kaynakça var.

Anjiyogenez süreci, hem normal şartlarda hem de hipoksik koşullarda VEGF gibi hücre proliferasyonunu sağlayan büyüme faktörleriyle beraber gerçekleşen bir süreçtir. Bu tez çalışmasının amacı, endotel hücre modeli olan HUVEC hücrelerinde normal ve düşük oksijen koşullarında VEGF sitokininin pro-kollajen N-propeptidaz üyeleri olan ADAMTS-2 ve ADAMTS-3 genlerinin regülasyonuna etkilerinin belirlenmesidir. ADAMTS-2 ve ADAMTS-3 genlerinin Saos-2, MG63, HUVEC hücre hatlarında mRNA seviyeleri belirlenmiştir. Buna göre HUVEC hücre hattında en fazla ifade olan üyenin ADAMTS-3 olduğu belirlenmiştir. Hipoksik ve normoksik koşullar karşılaştırıldığında mRNA seviyeleri ve farklı promotor parçalarıyla yapılan geçici transfeksiyon deneyleriyle elde edilen transkripsiyonel aktivite çalışmalarından, hipoksik koşullarda bu genlerin ekspresyonlarının arttığı belirlenmiştir. VEGF uygulanan HUVEC hücrelerinde ADAMTS-2 ve ADAMTS-3 promotor parçalarının transkripsiyonel aktivitelerinin normal oksijen koşullarında daha az hipoksik koşullarda daha fazla olduğu belirlenmiştir. VEGF artışının hangi hücre içi yolaktan gerçekleştirildiğinin belirlenmesi için yapılan çalışmalarda normal oksijen ve hipoksik koşulların farklı hücre içi yolakları kullandığı tespit edilmiştir. Bu doğrultuda ADAMTS-2 ve ADAMTS-3 genlerinin normoksik koşullarda PI3K ve p38 yolaklarını kullandığını anlamlı sonuçlarla belirlenmiştir. Hipoksik koşullarda ise ise VEGF regülasyonunun ADAMTS-2 geninde MAP kinaz, ADAMTS-3 geninde ise MAP kinaz, jnk ve p38 yolaklarıyla gerçekleştiği belirlendi. Hipoksik koşullarda ki ifadelerin normoksik koşullara göre fazla olması göz önüne alınarak EMSA deneyleri yapıldı. ADAMTS-2 promotorunun [-379/-348] bölgesinde ADAMTS-3 promotorunun ise [-969/-1000] bölgesinde Saos-2 hücrelerinde, [-644/628] bölgesinde hem Saos-2 ve HUVEC hücre hattında hem normoksik hemde hipoksik koşullara HIF-1α transkripsiyon faktörünün bağlanma bölgesinin olduğu belirlendi.